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临床标本采集、处理的注意事项
1.大便标本应收集在干净容器中,容器要带有密闭的盖。
肛拭子则应插入含有运送培养基的试管中送检。
2.腹泻患者应尽量在急性期(3d以内)、用药前采集新鲜标本送检。
按照操作标准,临床微生物实验室可以拒收住院超过3d的患者的大便标本。
3.应留取脓血、黏液、糊状、米泔样等性状异常的粪便标本及时送检。
4.沙门菌引起的肠热症,通常在发病后1~2w内采集血液或骨髓标本,2~3周则留取尿液和粪便标本进行细菌学检验。
5.怀疑是由气单胞菌属、邻单胞菌属、弧菌属等引起的胃肠炎,标本送检时要作特殊申请或在申请单上特别注明,因为它们的选择分离培养基与常规大便培养的完全不同。
6.对疑似细菌性食物中毒的患者,除粪便标本外,还应同时采取呕吐物、可疑剩余食物、胃肠冲洗液及血清等标本分离致病菌或检测毒素。
某些食物中毒是由细菌毒素所致,单纯粪便培养结果为阴性并不能排除食物中毒。
1.革兰阳性菌:金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌、蜡样芽孢杆菌、艰难芽孢梭菌。
2.革兰阴性菌:伤寒及其他沙门菌种、志贺菌属细菌、致病大肠埃希菌、弧菌属细菌、气单胞菌属细菌、类志贺邻单胞菌、小肠结肠炎耶尔森菌、弯曲菌属细菌。
3.真菌:念珠菌。
脓液及创面分泌物(pusandwoundsecretion)
脓液及创面分泌物中不存在正常菌群,但所有创伤表面均可有细菌污染但不一定发生感染,细菌学检查对局部细菌的控制有意义,同时对导致伤口感染、脓肿形成的病原学诊断有重要意义。
1.确定某些皮肤常居菌是否是创伤感染的病原菌时,要注意该菌是否在数量上占优势。
目前临床上区分是创伤感染还是污染,主要看细菌向活组织深部侵入的程度及每克组织含细菌量是否达到一定阈值。
一般认为每克组织内细菌数量在10^5~10^6以上时即可造成伤口感染。
2.软组织急性化脓性炎症,如毛囊炎、疖、痈最常见的病原菌是金黄色葡萄球菌;急性蜂窝组织炎的致病菌大多是溶血性链球菌或金黄色葡萄球菌、厌氧菌;丹毒是皮肤及网状淋巴管的急性炎症,由β溶血性链球菌从皮肤黏膜的细小伤口入侵所致。
3.化脓性疾病,如甲沟炎等亦多由金黄色葡萄球菌引起;细菌性角膜炎的致病菌包括肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、葡萄球菌,偶有脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌;鼻窦炎的常见致病菌是肺炎链球菌、葡萄球菌、卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌科细菌和真菌,由牙病引起的多为厌氧菌;心包炎的常见细菌有葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等;化脓性骨髓炎、化脓性关节炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌,其次为溶血性链球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、伤寒沙门菌等;其他化脓性疾病还有化脓性扁桃体炎、急性化脓性中耳炎、急性化脓性乳突炎、气性坏疽、胆囊炎以及结核性腹膜炎等。
4.脓肿,如扁桃体脓肿、咽部脓肿,常见致病菌为金黄色葡萄球菌、β溶血性链球菌以及a溶血性链球菌;肾皮质化脓性感染、肾皮质脓肿的常见病原菌是金黄色葡萄球菌;脑脓肿以耳源性脑脓肿最多见,多因慢性化脓性中耳炎或乳突炎并发胆脂瘤引起,鼻源性脑脓肿继发于鼻旁窦的化脓性炎症,较少见,隐源性脑脓肿是原发感染灶不明确的脑脓肿,多是血源性脑脓肿的隐匿型;肺脓肿是由多种细菌引起的肺部化脓性炎症、坏死,形成脓肿;其他部位的脓肿有肝脓肿、脓胸、腹腔脓肿、肾周脓肿以及直肠肛周脓肿等。
5.创伤感染,常见的有术后切口感染和导管感染等,近年来导管引起的感染和败血症的发病率明显上升,主要病原菌是金黄色葡萄球菌和革兰阴性杆菌,凝固酶阴性葡萄球菌如表皮葡萄球菌等也较常见。
6.烧伤创面在早期是无菌的,12h后会出现大量细菌。
引起烧伤创面感染的细菌种类很多,以铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌占首位,其次是变形杆菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌、粪产碱杆菌、普罗威登斯菌和鲍曼不动杆菌等。
7.耳部位的标本主要有拭子(诊断耳炎)和外耳、中耳液体(诊断中耳炎)。
这两个部位潜在感染的细菌有所不同。
铜绿假单胞菌常引起外耳炎,也可有其他细菌,但不会有厌氧菌。
来自呼吸道的菌群,包括肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉菌、金黄色葡萄球菌和一些革兰阴性杆菌都可能引起中耳炎,厌氧菌也可引起中耳炎。
临床标本采集、处理的注意事项
1.开放性感染和已破溃的化脓灶标本采集前先用无菌生理盐水冲洗表面污染菌,然后用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。
如果为慢性感染,则往往污染严重,很难分离到致病菌,可取感染部位下的组织送检并要求细菌定量。
2.有几种眼部感染的标本可采集用于微生物学检验,如用拭子或无菌刮勺采取的结膜标本用以诊断结膜炎;结膜刮取物做姬姆萨染色检查上皮细胞中的嗜碱性胞质包涵体可诊断沙眼衣原体感染;用刮勺刮取的角膜标本用以诊断角膜炎;玻璃体液用以诊断眼内炎;化脓性标本用以诊断蜂窝织炎等。
3.导管治疗引起的感染,应及时采血培养和做导管尖端培养。
对瘘道内脓液,用灭菌拭子挤压瘘管,选取脓液中的“硫磺样颗粒”
送检,也可将灭菌纱布塞人瘘管,次日取出送检。
对蜂窝组织炎、坏疽组织,应先用无菌生理盐水或70%乙醇擦拭清洁感染部位,然后用注射器吸取少量无菌生理盐水后抽取标本。
针管抽取的位置应是炎症最严重的区域(一般在中心)。
对烧伤部位,采集标本前要清创,若要作定量培养,则要采取3~4mm的活检组织切块。
4.对切口部位,也要尽量抽取标本或将拭子插入伤口深处采集标本。
采自其底部或脓肿壁上的标本检出率最高,从暴露在空气中的感染灶表面采集的标本容易被污染。
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