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第一节 病毒性肝炎病原学指标测定(第3页)

Pre-S2阳性提示病毒复制活跃,具有传染性;抗Pre-S2抗体是HBV的中和抗体,阳性时表示病情好转,较早出现是预后良好的指标,特别是对于急性乙肝的预后有重要意义。

参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

血清HBV-DNA荧光定量PCR测定

荧光定量PCR法:

血清HBV-DNA检测结果与乙肝五项指标的关系:

1.HBV-DNA与HBsAg一般HBsAg阳性时,HBV-DNA常阳性;但在HBsAg含量极低采用ELISA法检测不出时,可能会出现HBsAg阴性而HBV-DNA阳性的情况;或是患者正处于HBV感染早期,机体乙肝五项标志物尚未产生,但由于PCR检测具有极高的灵敏度,HBV-DNA含量很低也可检出。

2.HBV-DNA与抗-HBsHBV感染恢复期抗-HBs呈阳性,血清HBV-DNA-般为阴性,但少数患者特别是在肝组织HBV-DNA含量很高时,也可为阳性,提示体内HBV尚未完全被清除。

3.HBV-DNA与HBeAg、抗-HBe、抗-HBcHBeAg阳性时HBV-DNA几近全部为阳性;HBeAg阴性、抗-HBe和抗—HBc阳性时,说明HBV复制减弱,其HBV-DNA阳性检出率仍可高达80%,患者具有传染性。

除此之外还用于乙肝患者抗病毒药物的疗效观察、献血员筛查、血液制品及乙肝疫苗安全性评价。

PCR技术灵敏度很高,可由于实验操作不当、实验室设置不规范、消毒处理不彻底、标本收集不符合要求等造成污染,致使结果出现假阳性。

因此必须严格按照PCR实验室要求进行操作,采血使用一次性试管,标本室温放置不能超过6h,所用物品必须高压灭菌等。

血清HBV-DNA测定是评价HBV感染和复制最直接、最灵敏、最特异的指标,也是观察乙肝患者有无传染性最可靠的方法。

抗丙型肝炎抗体(anti-hepatitisCvirus,anti-HC)

丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)属于黄病毒科丙型肝炎病毒属,是一种直径为30~60nm的球形颗粒,外有脂质外壳、囊膜和棘突结构,内有由核心蛋白和核酸组成的核衣壳。

ELISA法:阴性。

抗HCV分为抗HCV-IgM和抗HCV-IgG,均为非保护性抗体,目前临床上检测的为总抗体,抗HCV阳性即是HCV感染的重要标志。

抗HCV-IgM阳性见于急性HCV感染,一般持续1—3m,是诊断HCV早期感染、病毒复制和传染性的指标,若持续阳性则提示病情易转为慢性;抗HCV-IgG出现晚于抗HCV-IgM,抗HCV-IgG阳性表示体内有HCV感染,但不能作为早期诊断指标,低滴度抗HCV-IgG提示病毒处于静止状态,高滴度提示病毒复制活跃。

抗HCV-IgM的检测影响因素较多,如球蛋白、类风湿因子等,稳定性不如抗HCV-IgG。

丁型肝炎病毒抗原测定(hepatitisDvirusantigen.HDVAg)和丁型肝炎病毒抗体测定(hepatitisDvirusantibody,anti-HDV)

HDV是一种缺陷的单股负链RNA病毒,呈球形,其复制需依赖于HBV的存在,包括以HBsAg作为外壳,核心为HDVAg和HDV-RNA,只有与HBV共存才能感染患者。

HDVAg是HDV唯一的抗原成分,因此仅一个血清型,刺激机体所产生的抗HDV不是保护性抗体。

临床诊断HDV感染主要依据为血清HDAg、抗HDV-IgM、抗HDV-IgG测定。

ELISA法:阴性。

参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

HDVAg:HDV急性感染早期出现,但很快下降,一般1~2w即难以检测到;慢性感染患者血清中HDVAg可持续阳性。

短期内阴转预后较好,持续阳性表示肝损害严重,预后欠佳。

抗HDV-IgM:抗HDV-IgM出现较早,但持续时间较短,用于急性感染早期诊断;抗HDV-IgG:只能在HBsAg阳性患者中检出,是诊断慢性HDV感染的可靠指标,急性期时滴度低,慢性感染滴度高,且HDV被清除后仍可持续多年。

重叠感染HBV和HDV时,常表现为抗HBc-IgM阴性、抗HDVlgM和抗HBclgG阳性,提示患者可能发展为肝硬化,且进展快。

戊型肝炎病毒抗体测定(anti-hepatitisEvirus,anti-HEV)HEV是引起肠道传播的戊型肝炎之病原体,传播方式及临床表现与甲肝相似,主要流行于亚洲、非洲、墨西哥等国家和地区,常通过饮用被污染的水源而导致戊肝暴发流行,散发病例分布于世界各地。

HEV为20面对称体球形颗粒,直径27~34nm,是一种无包膜RNA病毒,在核苷酸和氨基酸水平高度同源性的基础上,具大鼠等动物中分离到HEV样病毒,提示HEV为人畜共患疾病。

ELISA法:阴性。

急性期患者血清中可检出抗HEV-IgM,持续2~3m;恢复期可检出抗HEV-IgG,持续约1y,提示戊肝病后免疫不能持久。

戊肝为自限性疾病,一般不会转为慢性,但一部分患者,尤其是妊娠期若合并戊肝时,易发展为重症肝炎,可导致流产或死亡,病死率高达20%—30%。

HBV感染者重叠感染HEV也易发展为重症肝炎。

参见抗HAV抗体测定中ELISA法

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